培養(yǎng)基種類和細(xì)胞培養(yǎng)基選擇

1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細(xì)胞、正?；驉盒栽錾陌准?xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱非必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地...

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細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶和細(xì)胞工廠有哪些不同

近幾十年以來，隨著生命科技的快速發(fā)展，通過從動物組織中提取細(xì)胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)用以表達(dá)單克隆抗體、新藥開發(fā)等已成為普遍的技術(shù)。細(xì)胞的規(guī)模化擴(kuò)培成為新的細(xì)胞培養(yǎng)需求，目前細(xì)胞擴(kuò)增手段主要有：轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、細(xì)胞工廠和生物反應(yīng)器擴(kuò)培三種方式。轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)所面臨的挑戰(zhàn)：轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)雖然投資少、結(jié)構(gòu)簡單、技術(shù)成熟、擴(kuò)增只需加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等優(yōu)點(diǎn)，但是占地空間大、勞動強(qiáng)度大、產(chǎn)率低、細(xì)胞生長密度低、瓶間差異較難控制等，難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)?；a(chǎn)。生物反應(yīng)器培養(yǎng)雖然可以大大提高細(xì)胞產(chǎn)率但是剪切力會降低細(xì)胞的活率...

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基因定點(diǎn)突變技術(shù)

體外定點(diǎn)突變技術(shù)是當(dāng)前生物學(xué)各領(lǐng)域研究中的一種重要實(shí)驗手段，是改造、優(yōu)化基因的便捷方案，是探索啟動子調(diào)節(jié)位點(diǎn)的有效手段，也是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的復(fù)雜關(guān)系的有力工具。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定其功能，二者之間的關(guān)系是蛋白質(zhì)組研究的重點(diǎn)之一。對某個已知基因的特定堿基進(jìn)行定點(diǎn)改變、缺失或者插入，可以改變對應(yīng)的氨基酸序列和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，對突變基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行研究有助于人類了解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系，探討蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)/結(jié)構(gòu)域。CRISPR-Cas9系統(tǒng)的靶向雙鏈斷裂（DSB），基因組通常通...

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藥廠的清潔和消毒措施

對于制藥企業(yè)而言，當(dāng)某一產(chǎn)品生產(chǎn)完畢后，總會有一些微生物和少許原輔料殘留于設(shè)備中，在溫度和濕度達(dá)到一定程度時，微生物能夠與原輔料中殘留有機(jī)物出現(xiàn)無法物化反應(yīng)，通過大量繁殖能夠形成不同類型代謝物，這些代謝物會從一定程度上影響藥物藥效甚至?xí)a(chǎn)生毒副作用，從而使制藥企業(yè)每當(dāng)生產(chǎn)一段時間或者更換產(chǎn)品后會存在產(chǎn)品質(zhì)量問題，因此無論維修設(shè)備或設(shè)備空閑一段時間，需要實(shí)現(xiàn)設(shè)備清潔工作。對于制藥企業(yè)來說，清潔主要針對設(shè)備中殘留的微生物或者各種代謝物，其總量在不影響藥品規(guī)定的質(zhì)量、藥效及安全性。...

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CRISPR/Cas9 基因編輯和NGS驗證

CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)需要通過下一代測序(NGS)來驗證，能夠在核苷酸水平分辨率下進(jìn)行大規(guī)模評估基因編輯的準(zhǔn)確性和可靠性。高效、可自動化和可擴(kuò)展的CIRCLE-seq是一種體外NGS測定，可以對CRISPR介導(dǎo)的切割進(jìn)行靈敏的脫靶檢測。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)CRISPR代表成簇規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序列。這些重復(fù)的DNA片段最初來源于病毒病原體，并作為模板將CRISPR相關(guān)蛋白9(Cas9)核酸內(nèi)切酶引導(dǎo)至新入侵的病毒。當(dāng)Cas9遇到同源病毒序列時，它會...

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