TFF和ATF切向流技術(shù)在生物反應(yīng)器灌流培養(yǎng)中的應(yīng)用

TFF和ATF切向流技術(shù)在生物反應(yīng)器灌流培養(yǎng)中的應(yīng)用目前在生物反應(yīng)器中使用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行生物制藥與抗體生產(chǎn)已逐漸成為現(xiàn)代制藥新技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)關(guān)鍵工藝主要有三種即：批次培養(yǎng)、灌流培養(yǎng)、連續(xù)灌流培養(yǎng)。TFF和ATF切向流技術(shù)在灌流培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)工藝中應(yīng)用較為普遍。灌流培養(yǎng)工藝灌流培養(yǎng)工藝簡(jiǎn)單來(lái)講就是將細(xì)胞與培養(yǎng)基混合加入加入到生物反應(yīng)器進(jìn)行培養(yǎng)，而后通過(guò)細(xì)胞截流技術(shù)截留細(xì)胞，濾出廢棄培養(yǎng)基，灌注新培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的工藝過(guò)程。這種細(xì)胞培養(yǎng)方式比批次培養(yǎng)操作方便，產(chǎn)能及效率較高。...

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生物工程與生物反應(yīng)器

由于生物反應(yīng)器具有低成本控制，質(zhì)量產(chǎn)出高，生產(chǎn)過(guò)程相對(duì)集中等特點(diǎn)近年來(lái)被廣泛用于基因產(chǎn)品，基因制藥，細(xì)胞培養(yǎng)，疾控，農(nóng)業(yè)，微生物工程，新材料等各領(lǐng)域。從廣義上來(lái)講生物反應(yīng)器可以是動(dòng)物、植物個(gè)體或它們的器官和組織，比如牛的胃就是一個(gè)簡(jiǎn)單的生物反應(yīng)器。過(guò)去幾年中，生物學(xué)中使用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)蛋白類藥物的生物技術(shù)已被廣泛推廣。也有人嘗試用植物反應(yīng)器比如馬鈴薯等來(lái)生產(chǎn)藥類蛋白等。狹義的生物反應(yīng)器是指用于生物工程中的微生物、動(dòng)植物細(xì)胞、微載體等培養(yǎng)規(guī)?；糯蟮纳a(chǎn)設(shè)備。生物反應(yīng)器的類...

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使用生物反應(yīng)器培養(yǎng)系統(tǒng)制備小鼠心臟細(xì)胞片的實(shí)驗(yàn)方法

標(biāo)簽：生物反應(yīng)器成纖維細(xì)胞科普胰蛋白酶實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備和實(shí)驗(yàn)方法1.動(dòng)物和試劑野生型C57BL/6小鼠。以下抗體用于免疫細(xì)胞化學(xué)：抗肌節(jié)α-肌動(dòng)蛋白(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO)、抗心肌肌鈣蛋白T和抗肌球蛋白重鏈小鼠單克隆抗體和豚鼠單克隆抗波形蛋白抗體。除非另有說(shuō)明，試劑品牌選用Sigma。2.小鼠ES細(xì)胞培養(yǎng)維持在α-肌球蛋白重鏈啟動(dòng)子控制下表達(dá)EGFP的小鼠ES細(xì)胞。R1ES細(xì)胞普遍表達(dá)EYFP、在α-肌球蛋白重鏈啟動(dòng)子和潮霉素抗性基因上游的磷酸甘油酸激...

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CRISPR 激活與干擾篩選技術(shù)原理

在自身免疫、免疫缺陷和癌癥中，受刺激的T細(xì)胞中細(xì)胞因子產(chǎn)生的調(diào)節(jié)可能會(huì)被破壞。刺激依賴性細(xì)胞因子調(diào)節(jié)劑的系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)需要功能喪失和功能獲得研究，這在人類原代細(xì)胞中一直具有挑戰(zhàn)性。通過(guò)報(bào)告人類原代T細(xì)胞中的全基因組CRISPR激活(CRISPRa)和干擾(CRISPRi)篩選，以識(shí)別控制白介素-2(IL-2)和干擾素-γ(IFN-γ)產(chǎn)生的基因網(wǎng)絡(luò)。CRISPR激活與干擾篩選技術(shù)概述《科學(xué)》雜志中關(guān)于CRISPR激活、篩選有新進(jìn)展，CRISPR激活(CRISPRa)和CRISPR干...

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活細(xì)胞成像系統(tǒng)對(duì)顯微鏡的要求

在設(shè)計(jì)用于活細(xì)胞成像研究的光學(xué)顯微鏡系統(tǒng)時(shí)，主要考慮因素是檢測(cè)器靈敏度（信噪比）、所需的圖像采集速度和樣本活力。在使用活細(xì)胞時(shí)，必須嚴(yán)格避免在記錄固定細(xì)胞和組織的圖像時(shí)通常使用的相對(duì)較高的光強(qiáng)度和較長(zhǎng)的曝光時(shí)間（其中光漂白是主要考慮因素）。幾乎在所有情況下，活細(xì)胞顯微鏡都代表了實(shí)現(xiàn)較佳圖像質(zhì)量和保持細(xì)胞健康之間的折衷。原則上，理想的活細(xì)胞圖像采集系統(tǒng)應(yīng)該足夠靈敏，可以從弱熒光標(biāo)本中采集優(yōu)質(zhì)圖像，同時(shí)足夠快以記錄所有動(dòng)態(tài)過(guò)程。此外，該系統(tǒng)將具有足夠的分辨率來(lái)捕捉精細(xì)的樣本細(xì)節(jié)和...

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