貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)的基本步驟

我們知道開始培養(yǎng)的細(xì)胞不能無限期地生長，因?yàn)槭芟迏^(qū)域內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量不斷增加，營養(yǎng)物質(zhì)也會被消耗，從而導(dǎo)致有毒的代謝產(chǎn)物增加，另外根據(jù)實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)需要，也要對細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。通過去除培養(yǎng)基并將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新鮮的生長培養(yǎng)基和基質(zhì)中，細(xì)胞獲得了新鮮的營養(yǎng)并去除了有毒代謝物，從而可以長期維持培養(yǎng)。這個過程就屬于傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的細(xì)胞密度會低于原始培養(yǎng)物中的細(xì)胞密度。當(dāng)接種細(xì)胞后，細(xì)胞生長會經(jīng)過滯后期、對數(shù)期，穩(wěn)定期和凋亡期。在凋亡期，細(xì)胞會因缺乏營養(yǎng)或培養(yǎng)條件不當(dāng)而死亡。貼壁細(xì)胞傳代培...

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生物安全柜內(nèi)HEPA 和 ULPA 過濾器的區(qū)別

過濾器是生物安全柜的重要組成部分。了解過濾器的工作原理、維護(hù)級別以及過濾器需要多久更換一次，這些都是購買生物安全柜時需要考慮的因素。那么生物安全柜中的HEPA和ULPA過濾器有什么區(qū)別呢？生物安全柜中使用的過濾器，一般為高效微粒空氣(HEPA)過濾器和超低滲透(ULPA)過濾器，HEPA和ULPA過濾器有什么區(qū)別呢？HEPA和ULPA過濾器的結(jié)構(gòu)及其工作原理從結(jié)構(gòu)和化學(xué)角度來說，HEPA和ULPA過濾器非常相似。這些過濾器用于生物安全柜，其中氣流（由電機(jī)驅(qū)動）攜帶有害氣體和顆...

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國產(chǎn)PCR儀購買時的注意事項(xiàng)

國產(chǎn)PCR儀購買時的注意事項(xiàng)PCR儀作為分子生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)的常規(guī)儀器，每年都有數(shù)千臺的選購量，這兩年一批國產(chǎn)PCR儀正在興起。購買國產(chǎn)PCR儀需要考慮以下因素1樣本管的種類現(xiàn)在主要有0.2ml和0.5ml兩種，使用0.5mlPCR管的人員已經(jīng)很少了，一是0.5mlPCR專用的薄壁管很少見，二是如果想要較大體積的PCR產(chǎn)物，可以通過多分幾個0.2mlPCR管來實(shí)現(xiàn)。除非經(jīng)常需要較大體積的PCR產(chǎn)物，否則可以不必考慮0.5ml型的PCR儀。2樣本容量種類很多，0.2ml的有96孔...

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瓊脂糖凝膠電泳時注意事項(xiàng)

瓊脂糖凝膠電泳分子生物學(xué)常用的實(shí)驗(yàn)方法，那么在凝膠電泳過程中需要注意哪些事項(xiàng)呢？一、切膠時的注意事項(xiàng)1.盡量保證電泳的buffer和gel都是新制的，切膠的臺子清理干凈，刀片也要洗凈，確保切下的沒有外源dna污染。2.為了減少膠的體積，可以用相對比較薄的膠來做，只要夠點(diǎn)樣即可，也可采用薄而寬的梳子來跑膠。3.關(guān)于防護(hù)，戴一般有機(jī)玻璃眼罩就足夠了，戴上防護(hù)面具也以保護(hù)眼睛，如果戴樹脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者對于膠有特殊要求，例如要求不含EB，可以采用點(diǎn)marke...

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HEK293細(xì)胞的特點(diǎn)與應(yīng)用

HEK293細(xì)胞的特點(diǎn)和應(yīng)用人胚腎293(HEK293)細(xì)胞是生物技術(shù)和研究中常用的細(xì)胞系之一。由于HEK293細(xì)胞具有較高的生長效率，通常生成用于生物醫(yī)學(xué)和藥物研究的外源性蛋白質(zhì)。HEK293細(xì)胞也會被用于各種轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中。HEK293細(xì)胞起源和背景人胚腎293細(xì)胞AlexVanderEb在1970年代時培養(yǎng)出了HEK293細(xì)胞系。為了產(chǎn)生永生化細(xì)胞系，Graham將5型腺病毒的DNA轉(zhuǎn)染到HEK細(xì)胞的人類19號染色體中。Ad5整合到細(xì)胞基因組中導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的預(yù)防，從而導(dǎo)致細(xì)...

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