Vero細(xì)胞無血清懸浮培養(yǎng)技術(shù)驗(yàn)證

大多數(shù)用于抗體生產(chǎn)的細(xì)胞主要基于動物細(xì)胞上的開發(fā)，如MRC-5人二倍體細(xì)胞、Vero猿猴腎上皮細(xì)胞、Madin-Darby犬腎(MDCK)細(xì)胞和雞胚成纖維細(xì)胞。尤其是來自非洲綠猴腎臟的Vero細(xì)胞已被廣泛用于vaccine生產(chǎn)，因?yàn)樗鼈儽籛HO機(jī)構(gòu)證明沒有致癌潛力。許多vaccine，例如針對基孔肯雅熱、登革熱、日本腦炎、病毒性胃腸炎、脊髓灰質(zhì)炎、狂犬病、羅斯河熱、嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合癥、天花、西尼羅河腦炎和流感的vaccine都是使用Vero細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)開發(fā)的。用于viru...

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一文了解細(xì)菌內(nèi)毒素

內(nèi)毒素(Endotoxin)是一種脂多糖(LPS)，來源于革蘭氏陰性細(xì)菌外膜，其細(xì)胞壁外膜的外部脂質(zhì)成分由內(nèi)毒素分子組成，細(xì)胞死亡或分解后被釋放出來。LPS具有三個(gè)結(jié)構(gòu)，由菌體特異性多糖、非特異性核心多糖和脂質(zhì)A三部分構(gòu)成。內(nèi)毒素單體分子量為10kDa左右，在不同成分水溶液中，可形成大分子聚集體，大的可超過1000kDa。類脂A是內(nèi)毒素多種生物活性或毒性反應(yīng)的主要基團(tuán)。該基團(tuán)沒有種屬特異性,所以各屬細(xì)菌的類脂A結(jié)構(gòu)相似,其毒性反應(yīng)相似，如發(fā)熱、血液流動力學(xué)改變、彌漫性血管內(nèi)凝...

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細(xì)胞支原體污染的原因有哪些

細(xì)胞支原體污染的原因?qū)τ谏飳?shí)驗(yàn)器材細(xì)胞培養(yǎng)來說，如何預(yù)防細(xì)胞的支原體污染是每一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)者的都會考慮的問題，據(jù)統(tǒng)計(jì)，在細(xì)胞污染原因分析中有超過60%的細(xì)胞培養(yǎng)物污染都是由支原體所引起的。那么細(xì)胞支原體污染的原因有哪些呢？細(xì)胞支原體污染的原因主要包括：1.不良操作：如操作者未穿實(shí)驗(yàn)服、未戴口罩、未熏蒸操作臺等，容易引起污染。支原體一般通過難以追蹤的各種來源進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)物。其中包括實(shí)驗(yàn)室人員、血清、細(xì)胞培養(yǎng)基、水浴鍋、振蕩培養(yǎng)箱、生物反應(yīng)器、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等。人為污染是上述污染源中...

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細(xì)胞支原體污染怎么處理

用肉眼或光學(xué)顯微鏡檢測支原體比較困難，所以支原體檢測一般會通過PCR的檢測、DNA染色、熒光標(biāo)記、瓊脂平板接種等方法來實(shí)現(xiàn)。在支原體檢測之前，細(xì)胞應(yīng)連續(xù)培養(yǎng)至少兩周，以便有時(shí)間讓低水平的污染物生長。對于測試，在取樣前至少兩三天內(nèi)不應(yīng)更換培養(yǎng)基。一、培養(yǎng)法在瓊脂平板/肉湯上培養(yǎng)被認(rèn)為是檢測支原體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。在這種方法中，將細(xì)胞培養(yǎng)物的上清液添加到液體或半固體培養(yǎng)基（含有支原體生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)）中。受感染的細(xì)胞培養(yǎng)物會在液體肉湯和瓊脂平板上生長。瓊脂平板上很容易看到支原體菌...

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細(xì)胞培養(yǎng)試劑選購指南

細(xì)胞生物學(xué)研究、創(chuàng)新藥開發(fā)等領(lǐng)域經(jīng)常會進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)，但是很多實(shí)驗(yàn)員不知道該怎么選購細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)試劑，本節(jié)小編帶你初步了解一下細(xì)胞系的選擇技巧、購買細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)考慮的因素。一、細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境條件細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要為細(xì)胞創(chuàng)造良好的細(xì)胞的存活和增殖環(huán)境，這樣的環(huán)境條件包括培養(yǎng)溫度、濕度和CO2水平、營養(yǎng)成分、酸堿度、滲透壓等。下表為大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)的適宜條件。酸堿度7.0–7.4滲透壓280–320mmol/千克二氧化碳_5–10%溫度35–37°C二...

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